Nature.com'u ziyaret ettiğiniz için teşekkür ederiz. Kullandığınız tarayıcı sürümünde sınırlı CSS desteği vardır. En iyi sonuçlar için, tarayıcınızın daha yeni bir sürümünü kullanmanızı öneririz (veya Internet Explorer'da uyumluluk modunu devre dışı bırakın). Bu arada, sürekli destek sağlamak için siteyi stil veya JavaScript olmadan sergiliyoruz.
Yaralardaki mikrobiyal büyüme, genellikle iyileşmeye müdahale eden ve ortadan kaldırılması zor olan biyofilmler olarak kendini gösterir. Yeni gümüş pansumanlar yara enfeksiyonlarıyla mücadele ettiğini iddia ediyor, ancak antibiyofilm etkinliği ve enfeksiyondan bağımsız iyileşme etkileri genellikle bilinmiyor. Staphylococcus aureus ve pseudomonas aeruginosa'nın in vitro ve in vivo biyofilm modellerini kullanarak Ag1+ iyon üreten pansumanların etkinliğini rapor ediyoruz; Etilendiaminetetraasetik asit ve benzetonyum klorür (Ag1+/EDTA/BC) içeren Ag1+ pansumanlar ve gümüş nitrat (Ag oksaltları) içeren pansumanlar. yara biyofilmiyle mücadele etmek ve iyileşme üzerindeki etkisi için Ag1+, Ag2+ ve Ag3+ iyonları üreten. Ag1+ pansumanlarının yara biyofilmi üzerinde in vitro ve farelerde (C57BL/6J) minimal etkileri vardı. Aksine, oksijenli Ag tuzları ve Ag1+/EDTA/BC pansumanları, in vitro biyofilmlerde yaşayabilir bakteri sayısını önemli ölçüde azalttı ve fare yarası biyofilmlerinde bakteriyel ve EPS bileşenlerinde önemli bir azalma gösterdi. Bu pansumanların, biyofilm ile enfekte olmuş ve biyofilm ile enfekte olmayan yaraların iyileşmesi üzerinde farklı etkileri vardı, oksijenli tuz pansumanları, kontrol tedavileri ve diğer gümüş pansumanlara kıyasla yeniden diplizasyon, yara boyutu ve iltihaplanma üzerinde daha faydalı etkilere sahipti. Gümüş pansumanların farklı fizikokimyasal özellikleri, yara biyofilm ve iyileşme üzerinde farklı etkilere sahip olabilir ve biyofilm ile enfekte olmuş yaraların tedavisi için bir pansuman seçilirken bu dikkate alınmalıdır.
Kronik yaralar “iyileşmenin normal aşamalarında düzenli ve zamanında ilerleyemeyen yaralar” olarak tanımlanır 1. Kronik yaralar hastalar ve sağlık sistemi için psikolojik, sosyal ve ekonomik bir yük yaratır. 2017-182 yıllarında yaraların ve ilişkili komorbiditelerin tedavisi için yıllık NHS harcamalarının 8,3 milyar £ olduğu tahmin edilmektedir. Kronik yaralar da şu anda Amerika Birleşik Devletleri'nde acil bir sorundur ve Medicare, yaraları olan hastaları tedavi etmenin yıllık maliyetini 28,1-18 milyar dolar olarak tahmin etmektedir.
Enfeksiyon, yara iyileşmesini önleyen önemli bir faktördür. Enfeksiyonlar genellikle iyileşmeyen kronik yaraların% 78'inde bulunan biyofilmler olarak ortaya çıkar. Biyofilmler, mikroorganizmalar yara yüzeyleri gibi yüzeylere geri dönüşü olmayan bir şekilde bağlandığında oluşur ve hücre dışı polimer (EPS) üreten topluluklar oluşturmak için toplanabilir. Yara biyofilm, iyileşmeyi geciktirebilen veya önleyebilen doku hasarına yol açan artan bir enflamatuar yanıtla ilişkilidir 4. Doku hasarındaki artış kısmen matris metaloproteinaz, kollajenaz, elastaz ve reaktif oksijen türlerinin aktivitesinden kaynaklanabilir5. Ayrıca, enflamatuar hücreler ve biyofilmlerin kendileri yüksek oksijen tüketicileridir ve bu nedenle lokal doku hipoksisine neden olabilir ve etkili doku onarımı için gereken hayati oksijenin hücrelerini tüketebilir6.
Olgun biyofilmler antimikrobiyal ajanlara oldukça dirençlidir, bu da mekanik tedavi ve ardından etkili antimikrobiyal tedavi gibi biyofilm enfeksiyonlarını kontrol etmek için agresif stratejiler gerektirir. Biyofilmler hızla yenilenebildiğinden, etkili antimikrobiyaller cerrahi debridmandan sonra yeniden şekillenme riskini azaltabilir7.
Gümüş, antimikrobiyal pansumanlarda giderek daha fazla kullanılır ve genellikle kronik enfekte yaralar için birinci basamak bir tedavi olarak kullanılır. Her biri farklı bir gümüş bileşimi, konsantrasyon ve taban matrisi içeren ticari olarak temin edilebilen birçok gümüş pansuman vardır. Gümüş kol bantlarındaki gelişmeler yeni gümüş kol bantlarının geliştirilmesine yol açtı. Metalik gümüş formu (AG0) inerttir; Antimikrobiyal etkinlik elde etmek için, iyonik gümüş (Ag1+) oluşturmak için bir elektron kaybetmelidir. Geleneksel gümüş pansumanlar, sıvıya maruz kaldığında Ag1+ iyonları oluşturmak için ayrışan gümüş bileşikler veya metalik gümüş içerir. Bu Ag1+ iyonları bakteriyel hücre ile reaksiyona girerek elektronları yapısal bileşenlerden veya hayatta kalma için gerekli kritik işlemlerden uzaklaştırır. Patentli teknoloji, yara pansumanlarına dahil edilen yeni bir gümüş bileşiği Ag oksitaltlarının (gümüş nitrat, AG7NO11) geliştirilmesine yol açmıştır. Geleneksel gümüşten farklı olarak, oksijen içeren tuzların ayrışması, daha yüksek değere sahip gümüş durumları üretir (Ag1+, Ag2+ve Ag3+). İn vitro çalışmalar, düşük konsantrasyonların oksijenli gümüş tuzlarının, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus ve Escherichia coli8,9 gibi patojenik bakterilere karşı tek iyon gümüşten (Ag1+) daha etkili olduğunu göstermiştir. Başka bir yeni gümüş pansuman türü, biyofilm EPS'yi hedeflediği ve böylece gümüşün biyofilme penetrasyonunu arttırdığı bildirilen etilendiaminetetraasetik asit (EDTA) ve benzetonyum klorür (BC) içerir. Bu yeni gümüş teknolojiler yara biyofilmlerini hedeflemek için yeni yollar sunuyor. Bununla birlikte, bu antimikrobiyallerin yara ortamı ve enfeksiyondan bağımsız iyileşme üzerindeki etkisi, olumsuz bir yara ortamı yaratmamalarını veya iyileşmeyi geciktirmelerini sağlamak için önemlidir. İn vitro gümüş sitotoksisite ile ilgili endişeler birkaç gümüş pansuman ile bildirilmiştir10,11. Bununla birlikte, in vitro sitotoksisite henüz in vivo toksisiteye dönüşmemiştir ve birkaç Ag1+ pansuman iyi bir güvenlik profili göstermiştir12.
Burada, in vitro ve in vivo yara biyofilmine karşı yeni gümüş formülasyonlar içeren karboksimetilselüloz pansumanların etkinliğini araştırdık. Ek olarak, bu pansumanların bağışıklık tepkileri ve enfeksiyondan bağımsız iyileşme üzerindeki etkileri değerlendirildi.
Kullanılan tüm pansumanlar ticari olarak mevcuttu. 3M Kerracel Jel Fiber Pansuman (3M, Knutsford, İngiltere), bu çalışmada kontrol pansumanı olarak kullanılan antimikrobiyal olmayan% 100 karboksimetilselüloz (CMC) jel fiber pansumandır. Ağırlıkça%1.7 içeren 3M Kerracel AG sosu (3M, Knutsford, İngiltere) olmak üzere üç antimikrobiyal CMC gümüş pansuman değerlendirildi. Daha yüksek değerlik gümüş iyonlarında (Ag1+, Ag2+ve Ag3+) oksijenli gümüş tuz (Ag7NO11). Ag7NO11'in ayrışması sırasında Ag1+, Ag2+ ve Ag3+ iyonları 1: 2: 4 oranında oluşur. Aquacel AG% 1.2 gümüş klorür (Ag1+) (Concatec, Deeside, İngiltere) 13 ve Aquacel AG+% 1.2 gümüş klorür (Ag1+), EDTA ve benzetonyum klorür (Concatec, Deeside, UK) 14.
Bu çalışmada kullanılan suşlar Pseudomonas aeruginosa nctc 10781 (Halk Sağlığı İngiltere, Salisbury) ve Staphylococcus aureus nctc 6571 (Halk Sağlığı İngiltere, Salisbury) idi.
Bakteriler gece boyunca Muller-Hinton et suyunda (Oxoid, Altrincham, İngiltere) büyütüldü. Gecelik kültür daha sonra Mueller-Hinton et suyunda 1: 100 ve 200 uL steril 0.2 um Whatman Cyclopore membranlarına (Whatman Plc, Maidstone, İngiltere) Mueller-Hinton Agar Plakaları (Sigma-Aldrich Company Ltd, Kent, Büyük Britanya ). ) 24 saat boyunca 37 ° C'de sömürge biyofilm oluşumu. Bu sömürge biyofilmleri logaritmik büzülme açısından test edildi.
Pansumanı 3 cm2 kare parçaya kesin ve steril deiyonize su ile ön-moisten. Bandajı agar plaka üzerine koloninin biyofilminin üzerine yerleştirin. Her 24 hektar biyofilm çıkarıldı ve biyofilm içindeki canlı bakteriler (CFU/mL) gündüz açısı nötralizasyon suyunda (Merck-Millipore) seri seyreltme (10−1 ila 10−7) ile ölçüldü. 37 ° C'de 24 saatlik inkübasyondan sonra, Mueller-Hinton agar plakaları üzerinde standart plaka sayıları gerçekleştirildi. Her tedavi ve zaman noktası üç kez gerçekleştirildi ve her seyreltme için plaka sayıları tekrarlandı.
Domuz göbeği cildi, Avrupa Birliği ihracat standartlarına uygun olarak kesimden 15 dakika içinde kadın büyük beyaz domuzlardan elde edilir. Cilt traş edildi ve alkol mendilleri ile temizlendi, daha sonra cildi devralmak için 24 saat boyunca -80 ° C'de donduruldu. Çözüldükten sonra, 1 cm2 cilt parçaları üç kez PBS,% 0.6 sodyum hipoklorit ve% 70 etanol ile her seferinde 20 dakika yıkandı. Epidermisi çıkarmadan önce, kalan etanolü steril PBS içinde 3 kez yıkayarak çıkarın. Cilt, üstte 0.45 um kalınlığında naylon membran (Merck-Millipore) ve% 10 Dulbecco'nun modifiye edilmiş modifiye edilmiş 3 mL fetal sığır serumu (sigma) içeren 3 emici ped (Merck-Millipore) ile 6 oyuklu bir plakada kültürlendi Kartal. Medium (Dulbecco'nun Modifiye Kartal Ortamı - Aldrich Ltd.).
Sömürge biyofilmleri biyofilm maruziyet çalışmaları için tarif edildiği gibi büyütüldü. Biyofilm 72 saat boyunca kültürlendikten sonra, biyofilm steril bir aşılama döngüsü kullanılarak cilt yüzeyine uygulandı ve membran çıkarıldı. Daha sonra biyofilm, biyofilmin olgunlaşmasına ve domuzun cildine yapışmasına izin vermek için domuz dermisi üzerinde 37 ° C'de 24 saat daha inkübe edildi. Biyofilm olgunlaştıktan ve takıldıktan sonra, steril damıtılmış su ile önceden nemlendirilmiş 1.5 cm2'lik bir pansuman, doğrudan cilt yüzeyine uygulandı ve 37 ° C'de 24 saat inkübe edildi. Yaşayan bakteriler, her eksplanın apikal yüzeyine prestoblue hücre canlılık reaktifi (Invitrogen, Life Technologies, Paisley, İngiltere) eşit olarak uygulanarak ve 5 dakika inkübe edilerek boyanarak görselleştirildi. Leica MZ8 mikroskobundaki görüntüleri anında yakalamak için Leica DFC425 dijital kamerasını kullanın. Pembe renkli alanlar Image Pro Software sürüm 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD Image-Pro (mediacyc.com)) kullanılarak ölçüldü. Tarama elektron mikroskopisi aşağıda tarif edildiği gibi yapıldı.
Gece boyunca yetiştirilen bakteriler Mueller-Hinton et suyunda 1: 100 seyreltildi. Steril 0.2 μm Whatman Cyclopore membranına (Whatman, Maidstone, İngiltere) 200 ul kültür eklendi ve Mueller-Hinton agar üzerine kaplandı. Biyofilm plakaları, olgun biyofilm oluşumuna izin vermek için 37 ° C'de 72 saat süreyle inkübe edildi.
3 günlük biyofilm olgunlaşmasından sonra, doğrudan biyofilm üzerine 3 cm2 kare bir bandaj yerleştirildi ve 37 ° C'de 24 saat inkübe edildi. Bandajı biyofilm yüzeyinden çıkardıktan sonra, her biyofilmin yüzeyine 20 saniye boyunca 1 mL prestoblue hücre canlılık reaktifi (Invitrogen, Waltham, MA) ilave edildi. Renk değişiklikleri bir Nikon D2300 dijital kamera (Nikon UK Ltd., Kingston, İngiltere) kullanılarak kaydedilmeden önce yüzeyler kurutuldu.
Mueller-Hinton agar üzerinde gece kültürleri hazırlayın, tek tek kolonileri 10 mL Mueller-Hinton et suyuna aktarın ve 37 ° C'de (100 rpm) bir çalkalayıcı üzerinde inkübe edin. Gece boyunca inkübasyondan sonra kültür Mueller-Hinton et suyunda 1: 100 seyreltildi ve 300 uL, Mueller-Hinton agar üzerinde 0.2 um dairesel Whatman Cyclopore membranına (Whatman International, Maidstone, İngiltere) tespit edildi ve 72 saat içinde 37 ° C'de inkübe edildi. . . Olgun biyofilm, aşağıda tarif edildiği gibi yaraya uygulandı.
Hayvanlarla yapılan tüm çalışmalar, Manchester Üniversitesi'nde Hayvan Refahı ve Etik İncelemesi Ofisi (P8721BD27) tarafından onaylanan bir proje lisansı altında ve 2012 revize edilmiş ASPA kapsamında İçişleri Bakanlığı tarafından yayınlanan kılavuzlara uygun olarak gerçekleştirildi. Tüm yazarlar varış yönergelerine bağlı kalmıştır. Tüm in vivo çalışmalar için sekiz haftalık C57BL/6J fareleri (Envigo, Oxon, İngiltere) kullanıldı. Farelere izofluran (Piramal Crithic Care Ltd, West Drayton, İngiltere) ile anestezi uygulandı ve dorsal yüzeyleri traş edildi ve temizlendi. Her fareye daha sonra bir Stiefel biyopsi yumruk (Schuco International, Hertfordshire, İngiltere) kullanılarak 2 x 6 mm'lik bir eksizyon yarası verildi. Biyofilm ile enfekte olmuş yaralar için, yaralanmadan hemen sonra steril bir aşılama döngüsü kullanılarak yaranın dermal tabakasına yukarıda tarif edildiği gibi membranda yetiştirilen 72 saatlik sömürge biyofilm uygulayın ve zarın atın. Bir santimetre kare pansuman, nemli bir yara ortamını korumak için steril su ile önceden nemlendirilir. Pansumanlar doğrudan her yaraya uygulandı ve ek yapışma sağlamak için kenarların etrafına uygulanan 3M Tegaderm filmi (3M, Bracknell, İngiltere) ve mastisol sıvı yapıştırıcısı (Eloquest Healthcare, Ferndale, MI) ile kaplandı. Buprenorfin (Animalcare, York, İngiltere) bir analjezik olarak 0.1 mg/kg konsantrasyonda uygulandı. Çizelge 1 yöntemi kullanılarak yaralanmadan üç gün sonra cull fareleri, yara alanını gerektiği gibi kaldırın, yarıya indirin ve saklayın.
Hematoksilin (Thermofisher Scientific) ve eozin (Thermofisher Scientific) boyama, üreticinin protokolüne göre yapıldı. Yara alanı ve reepitelyalizasyon, Image Pro Software sürüm 10 (Media Cybernetics Inc, Rockville, MD) kullanılarak ölçüldü.
Doku kesitleri ksilen (Thermofisher Scientific, Loughborough, İngiltere) içinde dewaksed,% 100-50 dereceli etanol ile rehidre edildi ve kısaca deiyonize suya (Thermofisher Scientific) daldırıldı. İmmünohistokimya, üreticinin protokolüne göre Vectastain Elite ABC PK-6104 kiti (Vector Laboratories, Burlingame, CA) kullanılarak yapıldı. Nötrofillere birincil antikorlar NIMP-R14 (ThermoFisher Scientific) ve makrofajlar MS CD107B saf M3/84 (BD Biosciences, Wokingham, İngiltere) bloke edici çözeltide 1: 100, ardından 2 antikor antavak, vektastain ilave edildi. ABC ve vektör Nova kırmızı peroksidaz (HRP) substrat kiti (Vektör Laboratuvarları, Burlingame, CA) ve hematoksilin ile karşı boyanmıştır. Görüntüler bir Olympus BX43 mikroskobu ve bir Olympus DP73 dijital kamera (Olympus, Southend-on-Sea, İngiltere) kullanılarak elde edildi.
Cilt örnekleri, 4 ° C'de 24 saat boyunca 0.1 M HEPE (pH 7.4) içinde% 2.5 glutaraldehid ve% 4 formaldehid içerisinde sabitlendi. Numuneler dereceli etanol kullanılarak dehidre edildi ve bir Quorum K850 kritik nokta kurutma makinesi (Quorum Technologies Ltd, Loughton, İngiltere) kullanılarak CO2 içinde kurutuldu ve bir Quorum SC7620 Mini Püskürtme/Glow deşarj sistemi kullanılarak altın-para alaşımı ile kaplanmış. Örnekler, yaranın merkezi noktasını görselleştirmek için bir Fei Quanta 250 tarama elektron mikroskobu (Thermofisher Scientific) kullanılarak görüntülenmiştir.
Toto-1 iyodür (2 uM), eksize edilmiş fare yara yüzeyine uygulandı ve 5 dakika 37 ° C'de (termofisher bilimsel) inkübe edildi ve 37 ° C'de (Thermofisher Scientific) Syto-60 (10 uM) ile muamele edildi. Bir Leica TCS SP8 kullanılarak 15 dakikalık Z-Yığın görüntüleri oluşturuldu.
Biyolojik ve teknik çoğaltma verileri tablo haline getirildi ve GraphPad Prism V9 yazılımı (GraphPad Software, La Jolla, CA) kullanılarak analiz edildi. Her tedavi ile antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanı arasındaki farklılıkları test etmek için Dunnett'in post hoc testi kullanılarak çoklu karşılaştırmalarla tek yönlü varyans analizi kullanıldı. Bir p değeri <0.05 anlamlı kabul edildi.
Gümüş jel lifli pansumanların etkinliği ilk olarak Staphylococcus aureus ve Pseudomonas aeruginosa'nın biyofilm kolonilerine göre in vitro olarak değerlendirildi. Gümüş soslar farklı gümüş formülleri içerir: geleneksel gümüş pansumanlar Ag1+ iyonları üretir; EDTA/BC eklenmesinden sonra Ag1+ iyonları üretebilen gümüş pansumanlar, biyofilm matrisini yok edebilir ve gümüşün antibakteriyel etkisi altında bakterileri gümüşe maruz bırakabilir. iyon15 ve Ag1+, Ag2+ ve Ag3+ iyonlarını üreten oksijenli Ag tuzları içeren pansumanlar. Etkinliği, jellenmiş liflerden yapılmış animikrobiyal olmayan bir kontrol pansumanı ile karşılaştırıldı. Biyofilm içinde kalan canlı bakteriler her 24 saatte bir 8 gün boyunca değerlendirildi (Şekil 1). 5. günde, biyofilm 3.85 × 105s ile yeniden iltihaplandı. Staphylococcus aureus veya 1.22 × 105p. Biyofilm iyileşmesini değerlendirmek için aeruginosa. Antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanlarına kıyasla, AG1+ pansumanlarının Staphylococcus aureus ve Pseudomonas aeruginosa biyofilmlerinde bakteriyel canlılığı 5 gün boyunca minimal etkisi olmuştur. Aksine, oksijenli Ag ve Ag1 + + EDTA/BC tuzları içeren pansumanlar, 5 gün içinde biyofilm içindeki bakterilerin öldürülmesinde etkili olmuştur. 5. günde planktonik bakterilerle tekrarlanan aşılamadan sonra biyofilmin restorasyonu gözlenmemiştir (Şekil 1).
Gümüş pansumanlarla tedaviden sonra Staphylococcus aureus ve Pseudomonas aeruginosa biyofilmlerinde yaşanabilir bakterilerin miktarının belirlenmesi. Staphylococcus aureus ve pseudomonas aeruginosa'nın biyofilm kolonileri gümüş pansumanlar veya antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanları ile muamele edildi ve kalan canlı bakteri sayısı her 24 saatte bir belirlendi. 5 gün sonra, biyofilm 3.85 × 105s ile yeniden iltihaplandı. Staphylococcus aureus veya 1.22 × 105p. Bakteriyoplankton pseudomonas aeruginosa kolonileri biyofilm iyileşmesini değerlendirmek için ayrı ayrı oluşturuldu. Grafikler ortalama +/- standart hatayı gösterir.
Gümüş pansumanların biyofilm yaşayabilirliği üzerindeki etkisini görselleştirmek için, domuz ciltli ex vivo üzerinde yetiştirilen olgun biyofilmlere pansumanlar uygulandı. 24 saat sonra pansuman çıkarılır ve biyofilm, canlı bakteriler tarafından pembe bir renge metabolize edilen mavi reaktif bir boya ile boyanır. Kontrol sosları ile muamele edilen biyofilmler pembe idi, bu da biyofilm içinde yaşayabilir bakterilerin varlığını gösterdi (Şekil 2A). Aksine, Ag oxysols pansumanı ile muamele edilen biyofilm öncelikle maviydi, bu da domuz cildinin yüzeyinde kalan bakterilerin hayati olmayan bakteriler olduğunu gösterir (Şekil 2B). Ag1+ içeren pansumanlar ile muamele edilen biyofilmlerde karışık mavi ve pembe renklendirme, biyofilm içinde yaşayabilir ve hayati olmayan bakterilerin varlığını gösterirken (Şekil 2C), Ag1+ içeren EDTA/BC pansumanları baskın olarak bazı pembe lekelerle mavidir. Gümüş pansumandan etkilenmeyen alanları gösteren (Şekil 2D). Aktif (pembe) ve inaktif (mavi) alanların nicelendirilmesi, kontrol yamasının% 75 aktif olduğunu göstermiştir (Şekil 2E). AG1 + + EDTA/BC pansumanları, sırasıyla% 13 ve% 14 sağkalım oranları ile oksijenli Ag tuzlu pansumanlara benzer şekilde performans gösterdi. AG1+ pansuman ayrıca bakteriyel canlılığı%21 oranında azalttı. Bu biyofilmler daha sonra tarama elektron mikroskopisi (SEM) kullanılarak gözlendi. Kontrol pansumanı ve Ag1+ pansuman ile tedaviden sonra domuz derisini kaplayan bir Pseudomonas aeruginosa tabakası gözlendi (Şekil 2F, H), oysa Ag1+ pansuman ile tedaviden sonra birkaç bakteri hücresi bulundu ve altında birkaç bakteriyel hücre bulundu. Kollajen lifleri domuz derisinin doku yapısı olarak düşünülebilir (Şekil 2G). Ag1 + + EDTA/BC pansumanı ile tedaviden sonra bakteriyel plaklar ve altta yatan kollajen lif plakları görüldü (Şekil 2I).
Gümüş giyinme tedavisinden sonra Pseudomonas aeruginosa biyofilminin görselleştirilmesi. (A-D) Pseudomonas aeruginosa biyofilmlerinde domuz derisi üzerinde büyütülen bakteriyel canlılığı, gümüş pansumanlar veya antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanları ile tedaviden 24 saat sonra prestoBlue canlılık boyası kullanılarak görselleştirildi. Canlı bakteriler pembe, canlı olmayan bakteriler ve domuz derisi mavidir. (E) Tarama elektron mikroskopisi Image Pro sürüm 10 (FI) kullanılarak domuz derisi (pembe nokta) üzerinde büyütülen ve gümüş bir pansuman veya antimikrobiyal olmayan bir kontrol pansumanı ile tedavi edilen Pseudomonas aeruginosa biyofilmlerinin 24 saat boyunca niceliği. SEM ölçekli çubuk = 5 um. (J - M) Sömürge biyofilmleri filtreler üzerinde büyüdü ve 24 saatlik gümüş pansumanlarla inkübasyondan sonra prestoblue reaktif boya ile boyandı.
Pansumanlar ve biyofilmler arasındaki yakın temasın pansumanların etkinliğini etkileyip etkilemediğini belirlemek için, düz bir yüzeye yerleştirilen sömürge biyofilmleri, pansumanlarla 24 saat tedavi edildi ve daha sonra reaktif boyalarla boyandı. Tedavi edilmemiş biyofilm koyu pembe renktedir (Şekil 2J). Oksijenli Ag tuzları (Şekil 2K) içeren pansumanlar ile muamele edilen biyofilmlerin aksine, Ag1+ veya Ag1++ EDTA/BC içeren pansumanlarla muamele edilen biyofilmler pembe boyama bantları gösterdi (Şekil 2L, M). Bu pembe renklendirme, canlı bakterilerin varlığını gösterir ve pansuman içindeki sütür alanı ile ilişkilidir. Bu dikilmiş alanlar, biyofilm içindeki bakterilerin hayatta kalmasına izin veren ölü alanlar yaratır.
Gümüş pansumanların in vivo etkinliğini değerlendirmek için, olgun S. aureus ve P. aeruginosa biyofilmleri ile enfekte olmuş farelerin tam kalınlıkta eksize edilmiş yaraları antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanları veya gümüş pansumanlar ile tedavi edildi. 3 günlük tedaviden sonra, makroskopik görüntü analizi, antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanlarına ve diğer gümüş pansumanlara kıyasla oksijenlenmiş tuzlu pansumanlar ile muamele edildiğinde daha küçük yara boyutları gösterdi (Şekil 3A-H). Bu gözlemleri doğrulamak için yaralar hasat edildi ve yara alanı ve Reepitelyalizasyon, Image Pro yazılımı sürüm 10 (Şekil 3I-L) kullanılarak hematoksilin ve eozin lekeli doku kesitleri üzerinde ölçüldü.
Gümüş pansumanların yara yüzeyi üzerindeki etkisi ve biyofilmlerle enfekte olan yaraların yeniden epitelizasyonu. (A - H) Antimikrobiyal olmayan bir kontrol pansumanı, oksijenli Ag tuz pansumanı, bir Ag1+ pansuman ve bir Ag1++ pseudomonas aeruginosa (A - D) ve Staphylococcus aureus (E - H) biyofilmleri ile enfekte olmuş küçük hücreler giyinme. Temsili makroskopik görüntüler. Ag1 + + EDTA/BC soslu farelerin yaraları. (IL) Temsilci Pseudomonas aeruginosa enfeksiyonu, hematoksilin ve eozin ile boyanmış histolojik kesitler, yara alanı ve epitelyal rejenerasyonu ölçmek için kullanılır. Pseudomonas aeruginosa (M, N) ve Staphylococcus aureus (O, P) biyofilmleri (tedavi grubu başına n = 12) ile enfekte olmuş yaraların yara alanının (M, O) ve yüzdesi yeniden bölümleme (N, P). Grafikler ortalama +/- standart hatayı gösterir. * p = <0.05 ** p = <0.01 anlamına gelir; Makroskopik ölçek = 2.5 mm, histolojik ölçek = 500 um.
Pseudomonas aeruginosa biyofilmiyle enfekte olmuş yaralardaki yara alanının nicelendirilmesi (Şekil 3M), Ag oksizaltları ile muamele edilmiş yaraların ortalama 2.5 mm2 yara boyutuna sahipken, antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanın ortalama yara boyutu 3.1 mm2 olmasaydı, Doğru. istatistiksel anlamlılığa ulaştı (Şekil 3M). P = 0.423). Ag1+ veya Ag1++ EDTA/BC ile tedavi edilen yaralar, yara alanında (sırasıyla 3.1 mm2 ve 3.6 mm2) azalma göstermedi. Oksijenli Ag tuzlu pansuman ile tedavi, animikrobiyal olmayan kontrol pansumanından (sırasıyla% 34 ve% 15; P = 0.029) ve Ag1+ veya Ag1++ EDTA/BC'den (% 10 ve% 11) daha fazla yeniden epitelizasyonu teşvik etti ( Şekil 3n). . , sırasıyla).
S. aureus biyofilmleri ile enfekte olmuş yaralarda yara bölgesinde ve epitel rejenerasyonunda benzer eğilimler gözlenmiştir (Şekil 3O). Oksijenli gümüş tuzları içeren pansumanlar, bu azalma anlamlı olmamasına rağmen, kontrol animikrobiyal olmayan pansumaya (2.6 mm2) kıyasla yara alanını (2.0 mm2)% 23 azaltmıştır (P = 0.304) (Şekil 3O). Ek olarak, AG1+ tedavi grubundaki yara alanı hafifçe azalmış (2.4 mm2), Ag1++ EDTA/BC sosu ile muamele edilen yara yara alanını azaltmadı (2.9 mm2). AG'nin oksijen tuzları ayrıca, Aureus biyofilm (%31) ile enfekte olmuş yaraların animikrobiyal olmayan kontrol pansumanları (%12, p = 0.003) ile tedavi edilenlerden daha fazla yeniden epitelyalizasyonunu desteklemiştir (Şekil 3P). Ag1+ pansuman (%16, p = 0.903) ve Ag+ 1+ EDTA/BC pansumanı (%14, p = 0.965), kontrole benzer epitelyal rejenerasyon seviyeleri gösterdi.
Gümüş pansumanların biyofilm matrisi üzerindeki etkisini görselleştirmek için TOTO 1 ve SYTO 60 iyodür boyaması yapıldı (Şekil 4). TOTO 1 iyodür, biyofilm EPS'sinde bol miktarda bulunan hücre dışı nükleik asitleri doğru bir şekilde görselleştirmek için kullanılabilen hücre tarafından uygulanamayan bir boyadır. Syto 60, karşı saha olarak kullanılan hücre geçirgen bir boyadır16. Pseudomonas aeruginosa (Şekil 4A-D) ve Staphylococcus aureus'un (Şekil 4I-L) biyofilmleri ile aşılanan yaralarda Toto 1 ve Syto 60 iyodür gözlemleri, 3 günlük giyinme tedavisinden sonra biyofilmdeki EPS'nin önemli ölçüde azaldığını gösterdi. Ag ve Ag1 + + EDTA/BC oksijenli tuzlar içeren. Ek antibiyofilm bileşenleri olmayan AG1+ pansumanlar, Pseudomonas aeruginosa ile aşılanan yaralarda hücresiz DNA'yı önemli ölçüde azalttı, ancak Staphylococcus aureus ile aşılanan yaralarda daha az etkili oldu.
Kontrol veya gümüş pansumanlarla 3 günlük tedaviden sonra yara biyofilminin in vivo görüntülemesi. Hücre dışı biyofilm polimerlerinin bir bileşeni olan hücre dışı nükleik asitleri görselleştirmek için Toto 1 (yeşil) ile boyanmış Pseudomonas aeruginosa (A - D) ve Staphylococcus aureus'un (I - L) konfokal görüntüleri. Hücre içi nükleik asitleri lekelemek için Syto 60 (kırmızı) kullanın. asitler. P. Pseudomonas aeruginosa (E - H) ve Staphylococcus aureus (M - P) biyofilmleri ile enfekte olmuş yaraların tarama elektron mikroskopisi, kontrol ve gümüş pansumanlarla 3 günlük tedaviden sonra. SEM ölçekli çubuk = 5 um. Konfokal görüntüleme ölçeği çubuğu = 50 um.
Tarama elektron mikroskopisi, Pseudomonas aeruginosa (Şekil 4E-H) ve Staphylococcus aureus'un (Şekil 4M-P) biyofilm kolonileri ile aşılanan farelerin, tüm gümüş giysilerle 3 günlük tedaviden sonra yaralarında önemli ölçüde daha az bakteriye sahip olduğunu gösterdi.
Biyofilm ile enfekte olmuş farelerde gümüş pansumanların yara iltihabı üzerindeki etkisini değerlendirmek için, 3 gün boyunca kontrol veya gümüş pansumanlarla muamele edilen biyofilm ile enfekte olmuş yaraların bölümleri, nötrofiller ve makrofajlara özgü antikorlar kullanılarak immünohistokimyasal olarak boyanmıştır. Nötrofillerin ve makrofajların dahili olarak kantitatif belirlenmesi. Granülasyon dokusu. Şekil 5). Tüm gümüş pansumanlar, üç günlük tedaviden sonra antimikrobiyal olmayan kontrol pansumanlarına kıyasla Pseudomonas aeruginosa ile enfekte olmuş yaralarda nötrofil ve makrofajların sayısını azalttı. Bununla birlikte, oksijenli gümüş tuzlu pansuman ile tedavi, test edilen diğer gümüş pansumanlara kıyasla nötrofillerde (p = <0.0001) ve makrofajlarda (p = <0.0001) daha büyük bir azalmaya neden oldu (Şekil 5I, J). Ag1++ EDTA/BC'nin yara biyofilm üzerinde daha büyük bir etkisi olmasına rağmen, nötrofil ve makrofaj seviyelerini Ag1+ pansumandan daha az ölçüde azalttı. Kontrole kıyasla Ag (P = <0.0001), Ag1+ (p = 0.0008) ve Ag1 ++ EDTA/BC (P = 0.0043) oksisoller ile giyindikten sonra S. aureus biyofilm ile enfekte olmuş orta yaralar da gözlendi. Nötropeni için benzer eğilimler gözlenir. Bandaj (Şekil 5k). Bununla birlikte, sadece oksijenli Ag tuzlu pansuman, Granülasyon dokusundaki makrofaj sayısında, S. aureus biyofilmleri ile enfekte olan yaralarda kontrol ile karşılaştırıldığında önemli bir azalma göstermiştir (P = 0.0339) (Şekil 5L).
Nötrofiller ve makrofajlar, animrobiyal olmayan kontrol veya gümüş pansumanlarla 3 günlük tedaviden sonra Pseudomonas aeruginosa ve Staphylococcus aureus biyofilmleri ile enfekte olmuş yaralarda ölçüldü. Nötrofiller (AD) ve makrofajlar (EH), nötrofiller veya makrofajlar için spesifik antikorlarla boyanmış doku kesitlerinde ölçüldü. Pseudomonas aeruginosa (I ve J) ve Staphylococcus aureus (K&L) biyofilmleri ile enfekte olan yaralarda nötrofillerin (I ve K) ve makrofajların (J ve L) niceliği. Grup başına n = 12. Grafikler ortalama +/- standart hata, antibakteriyel olmayan kontrol pansumaya kıyasla anlamlılık değerleri gösterir, * p = <0.05, ** p = <0.01 anlamına gelir; *** p = <0.001; P = <0.0001) gösterir.
Daha sonra gümüş pansumanların enfeksiyondan bağımsız iyileşme üzerindeki etkisini değerlendirdik. Enfekte olmayan eksizyonel yaralar, animikrobiyal olmayan bir kontrol sosu veya 3 gün boyunca gümüş bir sos ile tedavi edildi (Şekil 6). Test edilen gümüş pansumanlar arasında, sadece oksijenli tuz pansumanı ile muamele edilen yaralar makroskopik görüntülerde kontrol ile muamele edilen yaralardan daha küçük göründü (Şekil 6A-D). Histolojik analiz kullanılarak yara alanının nicelendirilmesi, Ag Oxysols pansumanı ile tedaviden sonra ortalama yara alanının, kontrol grubuyla tedavi edilen yaralar için 2.96 mm2'ye kıyasla 2.35 mm2 olduğunu gösterdi, ancak bu fark istatistiksel anlamlılığa ulaşmadı (P = 0.488) ( 6i). Aksine, kontrol grubuna kıyasla Ag1+ (3.38 mm2, p = 0.757) veya Ag1++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++ Ag oxysol pansuman ile kontrol grubuna kıyasla artan epitel rejenerasyonu gözlendi (sırasıyla% 30'a karşı% 22), ancak bu anlamlılığa ulaşmamış olsa da (P = 0.067), bu oldukça önemlidir ve önceki sonuçları doğrular. Oxysols ile bir giyinme yeniden epitelizasyonu teşvik eder. Enfekte olmamış yaraların devre dışı bırakılması17. Aksine, Ag1+ veya Ag1+++ EDTA/BC pansumanları ile tedavinin hiçbir etkisi yoktu veya kontrole kıyasla yeniden epitelizasyonun azalması gösterdi.
Tam rezeksiyon ile enfekte olmamış farelerde gümüş yara pansumanın yara iyileşmesi üzerine etkisi. (AD) Antimikrobiyal olmayan bir kontrol pansumanı ve gümüş bir sos ile üç günlük tedaviden sonra yaraların temsili makroskopik görüntüleri. (EH) Hematoksilin ve eozin ile boyanmış temsili yara kesitleri. Yara alanının (I) ve reepitelizasyon yüzdesinin (J) niceliği, görüntü analizi yazılımı (tedavi grubu başına n = 11-12) kullanılarak yaranın orta noktasındaki histolojik bölümlerden hesaplandı. Grafikler ortalama +/- standart hatayı gösterir. * p = <0.05 anlamına gelir.
Gümüş, yara iyileşmesinde antimikrobiyal tedavi olarak uzun bir kullanım geçmişine sahiptir, ancak birçok farklı formülasyon ve iletim yöntemi antimikrobiyal etkinlikte farklılıklara neden olabilir 18. Ayrıca, belirli gümüş dağıtım sistemlerinin antibiyofilm özellikleri tam olarak anlaşılamamıştır. Konakçı bağışıklık yanıtı planktonik bakterilere karşı nispeten etkili olsa da, biyofilmlere karşı genellikle daha az etkilidir19. Planktonik bakteriler makrofajlar tarafından kolayca fagositoz edilir, ancak biyofilmler içinde, toplu hücreler, immün hücrelerin apoptoz geçirebileceği ve immün tepkisini arttırmak için proinflamatuar faktörleri serbest bırakabileceği ölçüde konakçı tepkisini sınırlandırarak ek problemler oluşturur. Bazı lökositlerin biyofilmlere nüfuz edebileceği, ancak bu savunma tehlikeye girdikten sonra fagositoz bakterileri yapamayacağı gözlenmiştir22. Yara biyofilm enfeksiyonuna karşı konakçı bağışıklık tepkisini desteklemek için bütünsel bir yaklaşım kullanılmalıdır. Yara debridasyonu biyofilmi fiziksel olarak bozabilir ve biyoburden çoğunu giderebilir, ancak konakçı bağışıklık tepkisi, özellikle konakçı bağışıklık tepkisi tehlikeye girerse, kalan biyofilmlere karşı etkisiz olabilir. Bu nedenle, gümüş pansumanlar gibi antimikrobiyal tedaviler konakçı bağışıklık tepkisini destekleyebilir ve biyofilm enfeksiyonlarını ortadan kaldırabilir. Kompozisyon, konsantrasyon, çözünürlük ve iletim substratı, gümüşün antimikrobiyal etkinliğini etkileyebilir. Son yıllarda, gümüş işleme teknolojisindeki gelişmeler bu pansumanları daha etkili hale getirmiştir. Gümüş giyinme teknolojisi ilerledikçe, bu pansumanların yara enfeksiyonunu kontrol etmedeki etkinliğini ve daha da önemlisi, bu güçlü gümüş formlarının yara ortamı ve iyileşme üzerindeki etkisini anlamak önemlidir.
Bu çalışmada, iki gelişmiş gümüş giysilerin etkinliğini, farklı in vitro ve in vivo modeller kullanarak biyofilmlere karşı AG1+ iyonları üreten geleneksel gümüş pansumanlar ile karşılaştırdık. Ayrıca bu pansumanların yara ortamı ve enfeksiyondan bağımsız iyileşme üzerindeki etkisini de değerlendirdik. Dağıtım matrisinin etkisini en aza indirmek için, test edilen tüm gümüş pansumanlar karboksimetilselülozdan oluşuyordu.
Bu gümüş pansumanların Pseudomonas aeruginosa ve Staphylococcus aureus'un sömürge biyofilmlerine karşı ön değerlendirmemiz, geleneksel AG1+ pansumanlardan farklı olarak, iki gelişmiş gümüş pansuman, Ag1++ EDTA/BC ve oksijenli Ag tuzları, 5'de etkili bir şekilde öldürüldüğünü göstermektedir. Birkaç gün. Ek olarak, bu pansumanlar planktonik bakterilere tekrar tekrar maruz kaldıktan sonra biyofilmin yeniden şekillenmesini önler. Ag1+ pansuman gümüş klorür, aynı gümüş bileşiği ve AG1++ EDTA/BC ile taban matrisi içeriyordu ve aynı dönemde biyofilm içinde bakteriyel canlılığı üzerinde sınırlı bir etkiye sahipti. Bir AG1++ EDTA/BC pansumanın, aynı matristen ve gümüş bileşikten oluşan bir AG1+ pansumandan daha etkili olduğu gözlemi, rapor edildiği gibi, gümüş klorürün biyofilme karşı etkinliğini arttırmak için ek bileşenlerin gerekli olduğu fikrini desteklemektedir. başka yerlerde15. Bu sonuçlar, BC ve EDTA'nın genel giyinme etkinliğine katkıda bulunan ek bir rol oynadığı ve bu bileşenin AG1+ pansumanlarında olmamasının in vitro etkinlik gösterilmemesine katkıda bulunmuş olabileceği fikrini desteklemektedir. Ag2+ ve Ag3+ iyonları üreten oksijenli Ag tuzlu pansumanlarının Ag1+ 'dan ve Ag1++ EDTA/BC'ye benzer seviyelerde daha güçlü antibakteriyel etkinlik sergilediğini bulduk. Bununla birlikte, yüksek redoks potansiyeli nedeniyle, Ag3+ iyonlarının yara biyofilmlerine karşı ne kadar aktif ve etkili kaldığı ve bu nedenle daha fazla çalışmayı hak ettiği belirsizdir. Ek olarak, bu çalışmada test edilmeyen Ag1+ iyonları üreten birçok farklı pansuman vardır. Bu pansumanlar, Ag1+ iyonlarının verilmesini ve bunların biyofilmlere karşı etkinliğini etkileyebilecek farklı gümüş bileşikleri, konsantrasyonları ve baz matrislerinden oluşur. Ayrıca, yara pansumanlarının biyofilmlere karşı etkinliğini değerlendirmek için kullanılan birçok farklı in vitro ve in vivo model olduğunu belirtmek gerekir. Kullanılan model türü ve bu modellerde kullanılan medyanın tuz ve protein içeriği, pansumanın etkinliğini etkileyecektir. İn vivo modelimizde, biyofilmin in vitro olgunlaşmasına izin verdik ve daha sonra yaranın dermal yüzeyine aktardık. Konak fare bağışıklık yanıtı, yaraya uygulanan planktonik bakterilere karşı nispeten etkilidir, böylece yara iyileştikçe bir biyofilm oluşturur. Olgun biyofilmin bir yaraya eklenmesi, olgun biyofilmin iyileşmeden önce yara içinde kendisini kurmasına izin vererek biyofilm oluşumuna konakçı bağışıklık tepkisinin etkinliğini sınırlar. Böylece, modelimiz, yaralar iyileşmeye başlamadan önce antimikrobiyal pansumanların olgun biyofilmler üzerindeki etkinliğini değerlendirmemizi sağlar.
Ayrıca, giyinme uyumunun, in vitro olarak yetiştirilen biyofilmler ve domuz derisi üzerindeki gümüş pansumanların etkinliğini etkilediğini bulduk. Yara ile yakın temas, pansumanın antimikrobiyal etkinliği için kritik olarak kabul edilir24,25. Oksijenli Ag tuzları içeren pansumanlar olgun biyofilmlerle yakın temas halindeydi, bu da 24 saat sonra biyofilm içindeki canlı bakteri sayısında önemli bir azalmaya neden oldu. Buna karşılık, Ag1+ ve Ag1++ EDTA/BC pansumanları ile tedavi edildiğinde, önemli sayıda canlı bakteri kaldı. Bu pansumanlar, biyofilm ile yakın teması önleyen ölü alanlar oluşturan pansumanın tüm uzunluğu boyunca dikişler içerir. İn vitro çalışmalarımızda, bu temassız alanlar biyofilm içinde uygulanabilir bakterilerin öldürülmesini engelledi. Bakteriyel canlılığı sadece 24 saat tedaviden sonra değerlendirdik; Zamanla, pansuman daha doymuş hale geldikçe, bu canlı bakteriler için alanı azaltarak daha az ölü alan olabilir. Bununla birlikte, bu sadece giyinmedeki gümüş türü değil, pansumanın bileşiminin önemini vurgular.
İn vitro çalışmalar farklı gümüş teknolojilerinin etkinliğini karşılaştırmak için yararlı olsa da, bu pansumanların konak doku ve bağışıklık tepkilerinin biyofilmlere karşı etkinliğine katkıda bulunduğu in vivo biyofilmler üzerindeki etkilerini anlamak da önemlidir. Bu pansumanların yara biyofilmleri üzerindeki etkisi, hücre içi ve hücre dışı DNA boyaları kullanılarak tarama elektron mikroskopisi ve biyofilmin EPS boyaması kullanılarak gözlendi. 3 günlük tedaviden sonra, tüm pansumanların biyofilm ile enfekte olmuş yaralarda hücresiz DNA'nın azaltılmasında etkili olduğunu, ancak Ag1+ pansumanın Staphylococcus aureus ile enfekte yaralarda daha az etkili olduğunu bulduk. Tarama elektron mikroskopisi, gümüş pansumanlar ile tedavi edilen yaralarda önemli ölçüde daha az bakteri olduğunu gösterdi, ancak bu oksijenli Ag tuzlu pansuman ve Ag1++ EDTA/BC pansumanı ile Ag1+ pansumanına kıyasla daha belirgindi. Bu veriler, test edilen gümüş pansumanların biyofilm yapısı üzerinde değişen derecelerde etkiye sahip olduğunu, ancak gümüş pansumanların hiçbirinin biyofilmi ortadan kaldıramadığını ve yara biyofilm enfeksiyonlarının tedavisine bütünsel bir yaklaşıma ihtiyaç duyulmadığını gösterdi; Gümüş kol bantlarının kullanımı. Tedaviden önce biyofilmin çoğunu gidermek için fiziksel debridman vardır.
Kronik yaralar genellikle şiddetli bir inflamasyon durumundadır, aşırı enflamatuar hücreler yara dokusunda uzun bir süre kalır, doku hasarına neden olur ve etkili hücresel metabolizma için gereken oksijeni ve yarada fonksiyonu tüketir26. Biyofilmler, hücre proliferasyonunun inhibisyonu ve göç ve proenflamatuar sitokinlerin aktivasyonu dahil olmak üzere iyileşmeyi çeşitli şekillerde olumsuz etkileyerek bu düşman yara ortamını şiddetlendirir27. Gümüş pansumanlar daha etkili hale geldikçe, yara ortamı ve iyileşme üzerindeki etkilerini anlamak önemlidir.
İlginç bir şekilde, tüm gümüş pansumanlar biyofilm bileşimini etkilemesine rağmen, sadece oksijenli gümüş tuzlu pansumanlar bu enfekte yaraların yeniden epitelyalizasyonunu arttırdı. Bu veriler önceki bulgularımızı desteklemek17 ve Kalan ve ark. (2017) 28, oksijenli gümüş tuzlarının iyi güvenlik ve toksisite profilleri gösterdi, çünkü daha düşük gümüş konsantrasyonları biyofilmlere karşı etkilidir.
Mevcut çalışmamız, antimikrobiyal gümüş pansumanlar ile bu teknolojinin yara ortamı ve enfeksiyondan bağımsız iyileşme üzerindeki etkisi arasındaki gümüş teknolojideki farklılıkları vurgulamaktadır. Bununla birlikte, bu sonuçlar Ag1 + + EDTA/BC pansumanın in vivo yaralı tavşan kulaklarının iyileşme parametrelerini geliştirdiğini gösteren önceki çalışmalardan farklıdır. Bununla birlikte, bunun nedeni hayvan modelleri, ölçüm süreleri ve bakteriyel uygulama yöntemlerindeki farklılıklar olabilir29. Bu durumda, yaralanmadan 12 gün sonra yara ölçümleri, pansumanın aktif bileşenlerinin biyofilm üzerinde daha uzun bir süre hareket etmesine izin vermek için alınmıştır. Bu, Ag1 + + EDTA/BC ile tedavi edilen klinik olarak enfekte bacak ülserlerinin başlangıçta bir haftalık tedaviden sonra ve daha sonra Ag1 + + EDTA/BC ile tedavinin önümüzdeki 3 haftasında ve 4 haftadan sonraki 4 hafta içinde boyut olarak arttığını gösteren bir çalışma ile desteklenmektedir. Antimikrobiyal olmayanların kullanımı. ilaçlar. Ülser boyutunu azaltmak için CMC pansumanları30.
Gümüşün bazı formları ve konsantrasyonlarının daha önce in vitro 11 sitotoksik olduğu gösterilmiştir, ancak bu in vitro sonuçlar her zaman vivo olarak olumsuz etkilere dönüşmez. Buna ek olarak, gümüş teknolojideki ilerlemeler ve gümüş bileşiklerin ve pansumanların konsantrasyonlarının daha iyi anlaşılması, birçok güvenli ve etkili gümüş pansumanın geliştirilmesine yol açmıştır. Bununla birlikte, gümüş giyinme teknolojisi ilerledikçe, bu pansumanların yara ortamı üzerindeki etkisini anlamak önemlidir31,32,33. Artan yeniden epitelizasyon oranının, pro-enflamatuar M1 fenotipine kıyasla anti-enflamatuar M2 makrofajlarının oranının artmasına karşılık geldiği daha önce bildirilmiştir. Bu, gümüş hidrojel yara pansumanlarının gümüş sülfadiazin ve antimikrobiyal olmayan hidrojeller ile karşılaştırıldığı önceki bir fare modelinde not edildi34.
Kronik yaralar aşırı iltihap gösterebilir ve aşırı nötrofillerin varlığının yara iyileşmesi için zararlı olabileceği gözlenmiştir35. Nötrofil tükenmiş farelerde yapılan bir çalışmada, nötrofillerin varlığı reepitelyalizasyonu geciktirdi. Aşırı nötrofillerin varlığı, kronik ve yavaş iyileşen yaralarla ilişkili olan süperoksit ve hidrojen peroksit gibi yüksek proteaz seviyelerine ve reaktif oksijen türlerine yol açar37,38. Benzer şekilde, makrofaj sayılarındaki bir artış, kontrolsüzse, gecikmiş yara iyileşmesine yol açabilir39. Makrofajlar pro-enflamatuar bir fenotipten iyileştirici bir fenotipe geçiş yapamazsa, bu artış, yaraların iyileşmenin enflamatuar fazından çıkamamasına neden olur 40. Biyofilm ile enfekte olmuş yaralarda nötrofillerde ve makrofajlarda 3 gün boyunca tüm gümüş pansumanlar ile bir azalma gözlemledik, ancak azalma oksijenlenmiş tuzlu pansumanlar ile daha belirgindi. Bu azalma, gümüşe bağışıklık tepkisinin doğrudan bir sonucu, azalmış biyoburden veya yaranın iyileşmenin daha sonraki bir aşamasında olması ve dolayısıyla yaradaki bağışıklık hücrelerinin azaltılmasının sonucu olabilir. Yaradaki enflamatuar hücre sayısının azaltılması, yara iyileşmesine elverişli bir ortamı koruyabilir. Ag oksizaltlarının enfeksiyondan bağımsız iyileşmeyi nasıl desteklediğinin etki mekanizması belirsizdir, ancak Ag oksizaltlarının oksijen üretme ve iltihaplanma aracısı olan zararlı hidrojen peroksit seviyelerini yok etme yeteneği bunu açıklayabilir ve daha fazla çalışma gerektirir17.
Kronik iyileşmeyen enfekte olmayan yaralar hem doktorlar hem de hastalar için bir sorun oluşturmaktadır. Birçok pansuman antimikrobiyal etkinlik iddia etse de, araştırmalar nadiren yara mikro ortamı etkileyen diğer temel faktörlere odaklanmaktadır. Bu çalışma, farklı gümüş teknolojilerinin farklı antimikrobiyal etkinliğe ve en önemlisi, enfeksiyondan bağımsız olarak yara çevresi ve iyileşme üzerinde farklı etkilere sahip olduğunu göstermektedir. Bu in vitro ve in vivo çalışmalar, bu pansumanların yara enfeksiyonlarının tedavisinde ve iyileşmeyi teşvik etmede etkinliğini gösterse de, bu pansumanların klinikteki etkinliğini değerlendirmek için randomize kontrollü çalışmalara ihtiyaç vardır.
Mevcut çalışma sırasında kullanılan ve/veya analiz edilen veri kümeleri, makul istek üzerine ilgili yazardan temin edilebilir.
Gönderme Zamanı: Tem-15-2024